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血液/循环核酸提取方案

点击次数:138  发布时间:2020-05-06

每当听到要提取血液样本的核酸

你是不是也和我一样有一种一脸懵的感觉?

是哪种物种的血?

(哺乳动物,禽类,还是两栖类?)

是什么类型的样本?

(新鲜血液,血凝块,冻存血,干血斑,血清血浆…)

样本体积多大?

如何选择提取方法?

……

血液/循环核酸提取方案

马上告诉你答案!

 

血液核酸提取方案

样本特点: 

材料成分复杂:血液样本中包含红细胞、白细胞、蛋白质、血小板等,提取时要保证裂解充分的同时去除无关杂质。

样本保存:

新鲜血液可直接收集于抗凝血管,保存于-20℃。大体积血液,可先裂红,将收集到的白细胞-20℃保存,保存效果更加。

血液中RNA在室温两小时即会被降解,选择新鲜血液进行提取

。如有需长期保存,建议选择RNA稳定剂RNALock 血液RNA稳定剂 (DP440,TIANGEN)进行处理,处理后的血液可在常温保存2天,4℃保存1周,-20℃度保存半年。

小体积(200μl)血液DNA提取方案:

大体积(0.25-5ml)血液DNA提取方案:

血液RNA提取方案:

干血斑核酸提取方案

 

样本特点

纸片吸附血液样本有限,充分裂解后进行离心,需要尽可能提高提取得率和纯度。

样本保存

常温保存

干血斑DNA提取方案

 循环核酸提取方案

样本特点

循环核酸在血清/血浆等体液中的含量很低,在肿瘤等疾病分析中样品珍贵,对提取得率要求很高。

样本保存

用于提取循环核酸的血清、血浆样本,应使用可以稳定样本中白细胞的血液保存管进行储存,尽可能减少在保存过程中因白细胞破裂释放基因组DNA,干扰循环核酸提取及下游检测实验结果。

循环核酸DNA提取方案

 

 

 

 

 

 

 

 

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