大容量低速冷冻离心机的实际运用分享

　　大容量低速冷冻离心机结构简单、安装方便、操作容易，能保持产品的晶粒形状，采用弹性支撑结构，能减少由于不均匀负载引起的振动，其运转平稳。能实现密封，避免对物料的污染。

　　下面咱们来了解下采用大容量低速冷冻离心机提染色体DNA，可直接应用于常规的分子生物学实验，包括PCR、限制性内切酶的切割，以及基因组文库的构建的实际应用：

　　1、取1ml过夜培养菌液于8000g，离心机离心2min。去除培养基后，用400ulSTE缓冲液（100mMNaCl，10mMTris/HCl，1mMEDTA，pH8.0）重悬菌体，按相同条件离心清洗菌体两次。

　　2、收集的菌体用200ulTE缓冲液（10mMTris/HCl，1mMEDTA，pH8.0）悬起后加约50mg直径425-600um规格的玻璃珠，再加入100ulTirs饱和苯酚。

　　3、上述混合液在漩涡振荡器上振荡（细菌，振荡60s；酵母，振荡120s-200s），随后于4℃，13000g，离心5min。

　　4、吸取上层水相（约160ul）转移至一个新的离心管中，加TE缓冲液补至200ul，再加入100ul氯仿混匀后，于4℃，13000g，离心5min。重复此步两到三次。

　　5、转移上层水相（约160ul）至一个新的离心管中，补加40ulTE和5ulRNase（10mg/ml），37℃消化10min。

　　6、加入100ul氯仿混匀于4℃，13000g，离心5min。

　　7、转移上层水相（约150ul）至一个新的离心管中。

　　8、至此，上层水相即含有纯化好的基因组DNA，可直接用于随后的常规分子生物学实验。

　　希望上述内容能够帮助大家更好的了解本产品。