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大容量低速冷冻离心机的实际运用分享

发布时间:2021-09-15浏览:35次

  大容量低速冷冻离心机结构简单、安装方便、操作容易,能保持产品的晶粒形状,采用弹性支撑结构,能减少由于不均匀负载引起的振动,其运转平稳。能实现密封,避免对物料的污染。
  下面咱们来了解下采用大容量低速冷冻离心机提染色体DNA,可直接应用于常规的分子生物学实验,包括PCR、限制性内切酶的切割,以及基因组文库的构建的实际应用:
  1、取1ml过夜培养菌液于8000g,离心机离心2min。去除培养基后,用400ulSTE缓冲液(100mMNaCl,10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)重悬菌体,按相同条件离心清洗菌体两次。
  2、收集的菌体用200ulTE缓冲液(10mMTris/HCl,1mMEDTA,pH8.0)悬起后加约50mg直径425-600um规格的玻璃珠,再加入100ulTirs饱和苯酚。
  3、上述混合液在漩涡振荡器上振荡(细菌,振荡60s;酵母,振荡120s-200s),随后于4℃,13000g,离心5min。
  4、吸取上层水相(约160ul)转移至一个新的离心管中,加TE缓冲液补至200ul,再加入100ul氯仿混匀后,于4℃,13000g,离心5min。重复此步两到三次。
  5、转移上层水相(约160ul)至一个新的离心管中,补加40ulTE和5ulRNase(10mg/ml),37℃消化10min。
  6、加入100ul氯仿混匀于4℃,13000g,离心5min。
  7、转移上层水相(约150ul)至一个新的离心管中。
  8、至此,上层水相即含有纯化好的基因组DNA,可直接用于随后的常规分子生物学实验。
  希望上述内容能够帮助大家更好的了解本产品。